本期遗传学与整合组学课题组为大家带来的是年六月份发表在FrontiersinPharmacology的“SalidrosideImprovesChronicStressInducedDepressiveSymptomsThroughMicroglialActivationSuppression”一文，描述SLDS治疗可以改善因不可预测的慢性应激引起的抑郁症状，表明红景天甙（SLD）通过干扰小胶质介导的神经炎症治疗SLD的潜在治疗应用。

抑郁症的发病机制仍然尚不清楚，然而多项研究表明，慢性精神胁迫可能是抑郁症形成和进展期间的关键致病因子之一。许多研究表明，小胶质细胞参与了抑郁症的形成和发展。在脑损伤后，可以激活小胶质细胞进入促炎形态，然后释放多种炎症细胞因子，这进一步损害了附近的神经元。因此，抑制有害的小胶质细胞激活和迁移可能是有希望的治疗症状的治疗策略。红景天甙（SLD）是一种酚醛苷化合物，从中药植物中萃取，有抑制炎症作用。

本篇文章报道了小胶质细胞参与了抑郁症的形成和发展，阐述了小胶质细胞在抑郁症的作用，使人们对于抑郁症中小胶质细胞的作用有了更深刻的认识，并且红景天甙（SLD）可以通过P38信号通路抑制有害的小胶质细胞激活和迁移。

此文章为更深入的探讨了抑郁症小胶质细胞激活和神经元凋亡相关的机制。

1.SLD减弱抑郁症暴露小鼠的抑郁症状

图1

SLD减弱抑郁症暴露小鼠的抑郁症状。

作者将小鼠随机地分为三组，并且在前天后进行强迫游泳测试、旷场测试和水迷宫测试显示三组各组间无差异。在造模后，又进行了多种行为学测试显示在暴露于慢性应激的小鼠中减少了运动的总距离，与对照组的趋势增加，这些结果表明，慢性应激可以诱导运动活性减少，SLD可能会显着改善症状。水迷宫测试检测了小鼠的空间学习和记忆能力。结果表明，在连续的6个训练日内，应力组与对照组相比具有明显更长的路径长度和增加的逃逸等待时间。然而，在SLD治疗组中，路径长度和逃逸等待时间显着降低。结果表明对照组和SLDs单独组无统计学差异，不包括SLD处理小鼠的改进行为的可能性是由运动活性的增加引起的。

2.SLD抑制了抑郁症小鼠海马的小胶质激活和促炎细胞因子释放和炎症途径信号

图2

RSLD抑制了抑郁症暴露小鼠的海马的小胶质激活和促炎细胞因子释放。

作者用IBA1和CD68标记海马组织中的小胶质细胞。在SLD处理之后，与抑郁症组比较，CD68阳性小胶质细胞组IBA1阳性小胶质细胞的量显着降低，表明SLD抑制了小胶质激活。接下来，作者研究了SLD是否抑制了小鼠的海马中的促炎细胞因子释放。定量RT-PCR结果显示，与对照相比，抑郁症组中IL-1β，IL-6，IL-18和TNF-α的mRNA水平显着增强。相反，在SLD处理后，这些促炎细胞因子的表达水平显着降低。与QRT-PCR的结果一致，与对照相比，应激组中IL-1β，IL-6，IL-18和TNF-α的蛋白质水平显着增强，而SLDS治疗显着减弱了它们的表达。

作者的WB结果表明，抑郁症小鼠增加了ERK1/2，P38MAPK，NF-κBP65在小鼠海马的磷酸化，而SLD处理组显著降低了此表达。这些数据表明，暴露于抑郁症后，SLD治疗最可能抑制炎症相关的信号通路。

3.SLD减轻LPS诱导的原代小胶质细胞中促炎细胞因子的水平。

图3

SLD减少了促炎细胞因子的水平，并抑制了LPS诱导的原代小胶质细胞中的小胶质细胞激活。

作者的表明，SLD在各浓度下在原代小胶质细胞中没有细胞毒性。然后研究了较低浓度SLD对LPS诱导炎症反应中促炎细胞因子的表达和释放的影响。QRT-PCR结果显示，IL-1β，IL-6，IL-18和TNF-α的mRNA表达显着降低了。ELISA结果还揭示了SLD处理时分泌的IL-1β，IL-6，IL-18和TNF-α的降低。可以得出结论，SLD表现出对LPS的抗促炎作用诱导原代小胶质细胞症的炎症反应。

作者的研究结果表明，抑郁症增加了ERK1/2，P38MAPK，NF-κBP65在小鼠中的磷酸化，而SLD处理组显著降低了此表达。这些数据表明SLD治疗最可能抑制炎症相关的信号通路。并且WB结果表明，SLD在LPS诱导BV2细胞中显着减弱了ERK1/2，P38MAPK，NF-κB和INOS的表达水平的激活，其与在慢性应激暴露小鼠中发现的结果一致。

4.SLD抑制LPS诱导的原代BV2细胞中的微胶质形态改变和吞噬能力

图4

SLD抑制了LPS诱导的原代小胶质细胞中的小胶质细胞形态改变和吞噬能力。

结果表明，LPS诱导的原代小胶质细胞中的Vimentin长丝的长度显着缩短，导致细胞形状和尺寸的变化。然而，SLDS显着降低了Vimentin长丝的减短。LPS诱导的原代小胶质细胞中的局灶性粘连量显着增强，相反，SLD恢复了与静息的原代小胶质细胞的条件相当的局灶性粘附性，这与其对细胞扩散的抑制一致一致。蛋白质印迹分析显示SLD抑制了原代小胶质细胞LPS诱导的Paxillin中Ser83的增强磷酸化。小胶质细胞的形态变化和细胞粘附最终影响其吞噬活性。因此，作者进一步检查了通过使用荧光珠暴露于LPS后原代小胶质细胞的吞噬能力是受SLD的影响。LPS诱导后，吞噬症测定显示原代小胶质细胞表现出较强的吞噬能力，而SLD可以显着递减LPS诱导的吞噬活性，这与形态和粘附分析结果一致一致。

5.SLD预防抑郁症小鼠神经元凋亡并降低PC12细胞中的微胶质神经毒性

图5

SLD预防抑郁症下的神经元细胞凋亡暴露小鼠并降低PC12细胞中的小胶质神经毒性。

作者的结果表明，抑郁症引起的小胶质激活导致神经元细胞凋亡。在凋亡细胞中，出现核染色质的压实，缩合和偏析。作者使用DAPI染色来确定SLD是否可以减少神经元细胞凋亡。显微镜测定显示，SLD可以明显减少抑郁症暴露小鼠的海马中凋亡核的数量。为了进一步符合SLD的这种效果，作者用原代小胶质细胞培养物的PC12细胞培养PC12细胞以检测微胶囊神经毒性。CCK-8试剂盒用于检测SLD是否表现出对PC12细胞的细胞毒性。结果表明，SLD在检测到的浓度下在PC12细胞中没有表现出细胞毒性。结果表明，从具有SLD预处理的原代小胶质细胞培养物中PC12细胞的活力显着增加。此外，使用附流式细胞术测定评估SLD的神经保护性能。结果表明，用SLD预处理的原代小胶质细胞培养物中的SLD显着降低了PC12细胞的细胞凋亡。总之，SLD可以通过抑制小胶质激活来实现神经保护功能。

6.模式图

图6

LPS诱导原代小胶质细胞中SLD的抗炎机制。

LPS信号诱导通过TLR激活小胶质细胞，进一步激活ERK1/2，P38MAPK，NF-κB信号传导。诱导炎症细胞因子IL-1β，IL-6，IL-18和TNF-α的转录。另一方面，细胞骨架变化产生驱动细胞活性和吞噬作用的机械力，这些与小胶质功能密切相关。LPS信号诱导细胞骨架蛋白组件，其导致从氨化状态改变。同时，它们调节焦点粘附组件，其导致电池附着状态改变。SLD可以抑制LPS信号转导，从而阻断小胶质细胞的激活并防止细胞骨架变化。

近几年的研究发现，小胶质细胞在毁灭神经可塑性中发挥着重要作用，对神经保护作用有害影响，并导致神经炎症的加重。并且作者提出了另一种分子机制，其中SLD可以通过改变微胶质细胞的形态和附着状态来促进抗衰伤，从而避免其在病理区域中的富集。

SLD可以防止有害的M1微胶质激活，并改善因无法预测的慢性胁迫引起的抑郁症状。作者的研究表明SLD在抑郁症治疗治疗中的潜在应用前景。

文献分享者：高伟铭

原文引用：

DOI:10./fphar..